2×Taq plus Master Mix 含染料

产品编号 产品名称 规格 

BL547A 2×Taq plus   Master Mix 含染料 1 ml 

BL547B 2×Taq plus   Master Mix 含染料 5 ml 

BL547C 2×Taq plus   Master Mix 含染料 25 ml 

BL547D 2×Taq plus   Master Mix 含染料 100 ml 

注：以50μl PCR反应体系为例，1ml可40次PCR反应，5ml可做200次PCR反应，25ml可1000次PCR反应，100ml可做4000次PCR反应。

产品简介：

本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq plus Master Mix专为常规PCR扩增反应优化，扩增长度可达8kb，能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，大大地简化了操作过程，减少了PCR操作过程中的污染。提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试，染料的加入不影响PCR反应，在PCR反应完成后可直接电泳，节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。

产品特点 ：

高效：以λDNA为模板，扩增长度可达8kb，能高效扩增≤4kb片段。

灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。

稳定：反复冻融几十次，4℃放置30天，室温放置一周后，扩增性能不受影响。

快捷：PCR反应所必需试剂集于一管，数分钟即可完成反应体系配制。

便利：PCR反应后可直接电泳。

质量保证：

经检测无外源核酸酶残留，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用说明：

1、冰浴中彻底融化2×Master Mix，混匀后离心快甩将溶液收集到管底。

2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

 50μl反应体系 终浓度 

2×Master Mix 25μl 1× 

上游引物 10μM 1-5μl 0.2-1.0 μM 

下游引物 10μM 1-5μl 0.2-1.0 μM 

模板 × μl 1-50（质粒）10ng-1μg（基因组） 

水 补至50μl 

3、快甩离心将反应液收集到管底。

4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。

5、PCR仪上执行以下程序：

步骤 温度 时间 循环数 

初始变性 94℃ 5 min 1 

变性 94℃ 30 sec 25-40* 

退火 Tm-5℃* 30 sec 

延伸 72℃ 1 min/kb 

最后延伸 72℃ 5 min 1 

注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件（温度、时间等）。

注意事项：

1、   需要溶解完全后使用，防止离子浓度不均匀。

2、   菌液 PCR 时预变性间≥5min，更有利于破壁。

3、   应根据实验目的选择合适循环数，会造成扩增量不足；循环数过多，扩增量增加，但突变率也会增加，并造成非特异性扩。

4、   根据引物 Tm 值设置合适退火温度 ，退火温度过低，会造成非特异性扩增；过高可能扩增不到。

5、   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。